济南DNA提取 有效去除杂质 质量稳定可靠

所用样品应为新鲜血浆或是血清样品，-80℃的冻存样品也适用但不能反复冻融。游离DNA提取试剂盒可有效结合血浆及血清中浓度低至50pg/ml 的游离DNA的片段，由于该试剂盒洗脱体积可低至20μl，这一特性使试剂盒具有浓缩提取低浓度游离DNA 片段的作用。
游离DNA（Cell-Free Circulating DNA，cf-DNA），是一种在细胞外呈现游离状态且无细胞状态的DNA，广泛存在于动植物及人类的血清、血浆、脑脊液、尿液、唾液或粪便当中。患者的血浆和血清中检测到了基因突变，并且与原发基因相一致，因此游离DNA逐渐受到重视。游离DNA已被是一种对于和胎儿以外的众多疾病的有用的生物标志物，包括创伤、败血症、无菌性、心肌梗塞、中风、移植、糖尿病和镰状细胞病等。游离DNA提取试剂盒能有效提取游离DNA，协助研究与诊断。

济南DNA提取 有效去除杂质 质量稳定可靠-南京兔牙生物科技有限公司
游离DNA提取试剂盒，包含裂解液、洗涤液A、洗涤液B、去抑制剂、磁珠和洗脱液；其中，洗涤液B中醇的浓度可以低于1％，甚至完全不含醇、不含表面活性剂。还有配套使用的，或包含或整合了所述试剂盒的全自动核酸提取系统。特别适合于短片段DNA，例如血浆游离DNA的提取，并且不会影响后续的PCR反应，具有使用安全、简便、快捷、成本低廉等优点。

游离DNA提取试剂盒的产品特点：
1、采用真空浓缩技术，富集提取液体样本中的低浓度DNA，使DNA的提取量、特别是提取浓度较普通试剂盒大幅提升，有效解决了因DNA浓度较低无法进一步分析和对靶基因进行检测的问题；
2、提取DNA纯度高，无抑制剂，提取的DNA可用于各种PCR、荧光定量PCR、测序和分子杂交等；
3、适用样本类型广，可有效富集提取血清、血浆、胸腹水、脑脊液、尿液、水样等液体样本中的DNA。

游离DNA提取试剂盒的操作步骤：
1、取200ul样品加入400μl Buffer ML及300μl异丙醇，漩涡震荡样品管以充分混匀。
2、充分混合震荡磁珠，使管内磁珠完全均匀悬浮起来，取40ul 磁珠加入样品管中，漩涡震荡该管30s使磁珠均匀悬浮于样品管中。1000-2000转离心1-2s收集管盖上的液体。
3、样品管室温放置10分钟。
注:放置期间如出现磁珠沉降现象应及时颠倒或是漩涡混匀，以保证磁珠对DNA的结合效率。
4、将样品管置于磁力架上1分钟左右或待磁珠被磁力架装置完全吸附，保持样品管在磁力架上静止，用移液吸取上清并弃掉，操作过程中避免触碰到磁珠团。
5、将装有磁珠的离心管移开磁力架，并确保其中的上清液全部移除。向管中加入600μl的Buffer W1，每秒1-2次的速度上下颠倒混匀直到磁珠分散开，无大的团块。1000-2000转离心 1-2s收集管盖上的液体。
6、将样品管置于磁力架上1分钟左右或待磁珠被磁力架装置完全吸附，保持样品管在磁力架上静止，用移液吸取上清并弃掉，操作过程中避免触碰到磁珠团。
7、将装有磁珠的离心管移开磁力架并确保其中的上清液全部移除，向管内加入600ulBuffer W2每秒1-3次的速度上下颠倒混匀直到磁珠分散开，无大的团块。1000-2000转离心 1-2s收集管盖上的液体。
8、将样品管置于磁力架上1分钟左右或待磁珠被磁力架完全吸附，保持样品管在磁力架上静止，用移液吸取上清并弃掉，操作过程中避免触碰到磁珠团。
9、重复步骤7-8一次，将管内的液体全部吸除干净，并将样品管从磁力架上取出。
10、将样品管于室温放置分钟，使残留Z醇充分挥发。
注：避免真空抽干，磁珠过于干燥将会降低DNA洗脱效率。
11、向管内加入20-100ul Elution Buffer并用移液轻轻吹打5-10次使磁珠充分重悬，操作过程中应避免产生气泡。
12、室温放置1-5分钟以充分洗脱。
注：为了达到产量请在放置期间定时混匀磁珠。
13、将洗脱样品管放回磁力架上1分钟或待所有磁珠都被磁力架装置完全吸附。
14、小心的将洗脱上清转移到新的灭过菌的管子中，在转移过程不要碰到磁珠，如出现磁珠悬起现象请重复步骤13-14。

游离DNA提取试剂盒利用游离DNA进行的产前筛查或检测，要进行游离DNA的提取纯化，这一 步是较重要，也是基本的步骤，提取产物的质量直接影响到后续检测结果的准确性和可靠性。由于游离DN段较小，在血浆中含量低，因此，游离DNA的提取试剂与普通的核酸提取试剂相比，需要有更高的提取效率，如果要满足大规模的筛查检测需要，游离DNA提取试剂盒还需要满足操作简单、成本低、能够实现自动化等要求。
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