武汉cfDNA提取 洗脱体积低 较高的提取效率

血液游离循环DNA 提取试剂盒专为从血清或是血浆中提取游离循环DNA 而设计，该试剂盒根据样品量分为200μl 样品的小提试剂盒以及适用样品量为1ml、2ml、2.5ml、5ml大的提取试剂盒。
目前用于血浆游离DNA提取纯化的方法主要有酚氯仿法、柱提取法和磁珠法，其中 酚氯仿法需要在核酸提取过程中使用对人体有害的溶剂，越来越难以被检验人员接受，而且该方法操作复杂，对于游离DNA来说提取效率较低，需要加大样本量来满足后续检测需求，同时在提取过程中需要进行高速离心操作，难以实现自动化。柱提取法是目前主要 使用的方法，该方法不需要使用毒性较大的溶剂，操作方法较酚氯仿法稍简单，但操作过程中仍然需要进行高速离心，同时提取效率较低，需要加大样本量来满足后续检测的需求，难以实现自动化。游离DNA提取试剂盒的磁珠法近几年才开始应用于DNA的提取，该方法的特点是提取过程不需要进行高速离心，容易实现自动化。

武汉cfDNA提取 洗脱体积低 较高的提取效率-南京兔牙生物科技有限公司
游离DNA提取试剂盒的产品优势：
1、血液游离循环DNA 提取试剂盒可在不用离心机真空抽滤的条件下稳定效率的提取游离DNA 片段。
2、可针对性的结合血浆及血清中的游离小片段DNA。
3、灵敏性高，可捕获血清或是血浆中低至50pg/ml 的游离循环DNA 片段。
4、洗脱体积可低至20μl（根据用户操作水平洗脱体系可以更小），该特性保证了所提取样品的高浓度。
5、适用于全自动机械化多样品平台操作，免去了离心及真空等耗人工的操作步骤。
6、磁珠操作较传统离心柱操作由于材料本身的特点，可保证从样品中提取出来的DNA 损失可降至低。

游离DNA提取试剂盒的操作步骤：
1、取200ul样品加入400μl Buffer ML及300μl异丙醇，漩涡震荡样品管以充分混匀。
2、充分混合震荡磁珠，使管内磁珠完全均匀悬浮起来，取40ul 磁珠加入样品管中，漩涡震荡该管30s使磁珠均匀悬浮于样品管中。1000-2000转离心1-2s收集管盖上的液体。
3、样品管室温放置10分钟。
注:放置期间如出现磁珠沉降现象应及时颠倒或是漩涡混匀，以保证磁珠对DNA的结合效率。
4、将样品管置于磁力架上1分钟左右或待磁珠被磁力架装置完全吸附，保持样品管在磁力架上静止，用移液吸取上清并弃掉，操作过程中避免触碰到磁珠团。
5、将装有磁珠的离心管移开磁力架，并确保其中的上清液全部移除。向管中加入600μl的Buffer W1，每秒1-2次的速度上下颠倒混匀直到磁珠分散开，无大的团块。1000-2000转离心 1-2s收集管盖上的液体。
6、将样品管置于磁力架上1分钟左右或待磁珠被磁力架装置完全吸附，保持样品管在磁力架上静止，用移液吸取上清并弃掉，操作过程中避免触碰到磁珠团。
7、将装有磁珠的离心管移开磁力架并确保其中的上清液全部移除，向管内加入600ulBuffer W2每秒1-3次的速度上下颠倒混匀直到磁珠分散开，无大的团块。1000-2000转离心 1-2s收集管盖上的液体。
8、将样品管置于磁力架上1分钟左右或待磁珠被磁力架完全吸附，保持样品管在磁力架上静止，用移液吸取上清并弃掉，操作过程中避免触碰到磁珠团。
9、重复步骤7-8一次，将管内的液体全部吸除干净，并将样品管从磁力架上取出。
10、将样品管于室温放置分钟，使残留Z醇充分挥发。
注：避免真空抽干，磁珠过于干燥将会降低DNA洗脱效率。
11、向管内加入20-100ul Elution Buffer并用移液轻轻吹打5-10次使磁珠充分重悬，操作过程中应避免产生气泡。
12、室温放置1-5分钟以充分洗脱。
注：为了达到产量请在放置期间定时混匀磁珠。
13、将洗脱样品管放回磁力架上1分钟或待所有磁珠都被磁力架装置完全吸附。
14、小心的将洗脱上清转移到新的灭过菌的管子中，在转移过程不要碰到磁珠，如出现磁珠悬起现象请重复步骤13-14。

血清、血浆等液体样本中游离DNA的有效提取一直是个难题，游离DNA提取试剂盒用于提取较大量液体样本中低浓度DNA的富集提取试剂盒。试剂盒配套便携式真空装置，采用DNA吸附膜，可有效富集提取液体样本中的低丰度DNA，使DNA的提取量和提取浓度得以大幅提升，有效解决了因洗脱液中DNA浓度过低无法进一步分析的问题，如基因克隆、基因检测、微生物核酸检测、测序等。

游离DNA（Cell-Free Circulating DNA，cf-DNA），是一种在细胞外呈现游离状态且无细胞状态的DNA，广泛存在于动植物及人类的血清、血浆、脑脊液、尿液、唾液或粪便当中。患者的血浆和血清中检测到了基因突变，并且与原发基因相一致，因此游离DNA逐渐受到重视。游离DNA已被是一种对于和胎儿以外的众多疾病的有用的生物标志物，包括创伤、败血症、无菌性、心肌梗塞、中风、移植、糖尿病和镰状细胞病等。游离DNA提取试剂盒能有效提取游离DNA，协助研究与诊断。
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