血浆病原DNA提取试剂盒的操作简便性也是血浆DNA提取试剂选择的一个重要因素。操作过于复杂,不仅费时费力,还容易导致样本间的交叉污染,也容易损失样本。
血浆病原DNA提取试剂盒使用注意事项:
1、裂解液、洗涤液含有一定性化学物质,操作过程请做好防护措施,避免直接接触皮肤,防止吸入鼻和口中。如不慎沾染皮肤或眼睛,请立即用清水或生理盐水冲洗,必要时请就医。
2、如血液量不足200μL,请用0.85% 生理盐水补至200μL;如血液量**出200μL,请使用中量血液DNA提取试剂盒或血液富集DNA提取试剂盒。
3、如果提取的血液为鸟类、禽类的血液,因有核红细胞较多,提取血液量应适当减少,研究者应该进行优化实验,选择合适用量。
4、提取的DNA如暂不使用,应-20℃保存。
上海病原DNA提取 去除杂质污染 得出的数值较为准确-南京兔牙生物科技有限公司
实验室工作中,经常会需要用到纯化的DNA,这时我们通常需要使用一个商业的DNA提取试剂盒对目的DNA进行分离纯化。市面上有很多类型的提取试剂盒,当使用不太熟悉的样本类型时,选择合适的盒子是尤为关键的。
目前大多数DNA提取试剂盒遵循相同的基本步骤:裂解、柱纯化、洗涤杂质、柱洗脱。然而,不同的盒子在完成每个步骤的方式上有很大的不同。
血浆病原DNA提取试剂盒产品特点:
1、操作简便快速,20分钟左右可获得理想的DNA;
2、提取DNA纯度高,无抑制剂,1.7<A260/A280≤2.0;
3、产量更高,较国内同类产品高出20%;
4、样本范围广,可用于新鲜、冷冻或陈旧的全血样本。
血浆病原DNA提取试剂盒的操作步骤:
1、取出洗涤液,按以下操作:
洗涤液A:21mL加入9mL无水乙醇;42mL加入18mL无水乙醇,混匀。
洗涤液B:9mL加入21mL无水乙醇;18mL加入42mL无水乙醇,混匀。
配制好的洗涤液如出现沉淀,可在37℃溶解,摇匀后使用。
2、取1.5mL离心管,加入200μL血液样本,再加入200μL 裂解液及40μL 消化液,振荡混匀,65℃水浴10 分钟。
3、加入150μL异丙醇(总体积的25%),混合均匀,如有半透明悬浮物,不影响DNA的提取与后续实验。
4、将吸附柱放入收集管内,将上述溶液转入吸附柱内,12,000 rpm 离心1 分钟,弃收集管内废液;
5、将吸附柱放回收集管内,加500μL 洗涤液A至吸附柱内,12,000 rpm 离心1 分钟,弃收集管内废液。
6、将吸附柱放回收集管内,加500μL 洗涤液B至吸附柱内,12,000 rpm 离心1 分钟,弃收集管内废液。
7、按每份样本40μL 取洗脱液,放置于灭菌1.5mL离心管,65℃预热。
8、将吸附柱放回收集管内,12,000 rpm 离心2 分钟,离去残留的洗涤液。
9、取出吸附柱,放入新的1.5 mL 灭菌离心管内,在吸附柱中心加入40 μL 预热洗脱液,静置2分钟,12,000 rpm 离心1分钟,收集DNA溶液。提取的DNA即可用于下一步实验或-20℃保存。
血液游离DNA(又称血液循环DNA)是指血液中游离于细胞外的DNA,其来源主要有三:白细胞崩解释放的DNA、坏死组织特别是肿 瘤组织释放入血液的DNA和感染病毒等的DNA。近几年来,随着基因诊断技术的发展,游离核酸的应用价值越来越大,如优生筛查、早期诊断、遗传病检测和病原体感染基因检测等。但血液中游离DNA含量一般较低,片段较小,不易提取,这大大影响了游离核酸的基因检测和各种研究的开展。
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